パディントンは、「老グマホーム」で暮らすルーシーおばさんを訪ね、ブラウン一家とペルーへ家族旅行に出る。ところが、おばさんは眼鏡と腕輪を残して失踪していた。パディントンたちは、ルーシーおばさんが残した地図を手掛かりに、インカの黄金郷があるというジャングルの奥地へとおばさんを探す冒険の旅に出る。そして、そこには、家族の絆が試されるパディントンの秘密が待っていた。

パディントンの声を担当するのは、「007」シリーズのベン・ウィショー。ブラウンさん役に「ダウントン・アビー」シリーズのヒュー・ボネビル、娘のジュディ役はマデライン・ハリス。そして今回、ブラウン夫人役にはサリー・ホーキンスからバトンを受け取った「シャッター アイランド」（2010年）や「メリー・ポピンズ リターンズ」（18年）などのエミリー・モーティマーが出演する。

吹き替え声優は、3作品にわたりパディントンの吹き替えを務める松坂桃李、パディントンと一緒に暮らすブラウン一家の長、ブラウンさん役に古田新太。ブラウン家の長女・ジュディ役は三戸なつめ。さらにパディントンたちが大冒険を繰り広げるペルーで出会う、老グマホームの院長・クラリッサ（オリビア・コールマン）役を吉田羊が務める。